Содержание аскорбиновой, дегидроаскорбиновой и дикетогулоновой кислот в эритроцитах здоровых детей и страдающих инсулинзависимым сахарным диабетом
своей биологической активности высокоспецифична. Витаминная активность
проявляется только при наличии свободных гидроксильных групп. Различные
функциональные производные по ним лишают молекулу витаминной активности
почти полностью, как и гидрирование ненасыщенной связи лактонного кольца.
Поэтому L-ДАК имеет витаминную активность, равноценную L-АК, тогда как 2,3-
ДКГК полностью ее лишена. Вследствие легкой окисляемости L-АК – донор Н+,
она количественно легко восстанавливает многочисленные соединения, как-то:
йод, перманганат калия и другие. L-АК – переносчик Н+ в некоторых
ферментативных реакциях живой клетки, она легко окисляется пероксидазой,
цитохромоксидазой, каталазой. L-АК восстанавливает окисленные формы
ферментов, окисляясь в ДАК, обратимо легко регенерирующуюся в АК под
действием глутатиона за счет его сульфгидрильной группы:
[pic]
[pic]
[pic]
[pic]
Окисление АК катализируется медью, в меньшей степени – катионами серебра
и железа. Имеется предположение, что специфическим катализатором окисления
АК в животных организмах является белок, синтезирующийся в печени,
осуществляющий транспорт меди, обладающий оксигеназной активностью, -
церулоплазмин. В меньшей степени окисление аскорбата катализируют другие
катионы, в частности, серебра и железа. Комплексоны, флавоноиды тормозят
окислительный распад АК. Некоторые белки ингибируют окисление АК,
связываясь с ней или путём образования комплекса с медью – сывороточные
глобулины (Борец, 1980). Окисление тормозится –SH содержащими соединениями:
сернистая кислота блокирует фермент аскорбиназу; С-SH связывает ионы Cu+,
удаляя т. с. катализатор окисления АК из реакции (Киверин, 1971).
1.2.2. Биосинтез АК в живом организме
L-АК синтезируется в растениях и организме некоторых животных из D-
глюкозы через лактон D-глюкуроновой кислоты и L-гулоно-?-лактон или их
производное. В процессе биосинтеза происходит превращение соединений D-ряда
в соединения L-ряда (Березовский, 1993):
Биосинтез АК в организме животных происходит в клетках печени, почек,
надпочечников, гипофиза, стенки тонкого кишечника (Киварин, 1973).
1.2.3. Физиологические свойства аскорбата
Витамин С является постоянной составной частью тканей и органов
человека. Его поступление в организм должно быть ежедневным, т. к.
аскорбат, играя важную роль в обменных процессах организма, все время
расходуется. Он восстанавливает окисленные формы ферментов, активирует
некоторые протеазы, тормозит действие амилазы и протеазы поджелудочной
железы, активирует эстеразу печени. L-АК участвует в обмене некоторых
ароматических аминокислот, регулирует уровень холестерина в крови,
усиливает антитоксические функции гепатоцитов (вкупе с глюкозой),
норамализирует белковообразование. Витамин С необходим для нормального
функционирования клеток, продуцирующих коллаген, активирует и регулирует
зритропоэз (способствуя усвоению железа), нормализует нарушенное
протромбинообразование, нормализует процессы свертывания (Андреев; 1996).
Аскорбат играет положительную роль в развитии иммунных реакций организма,
обладает некоторым детоксицирующим свойством, является существенным
фактором профилактики и лечения инфекционных заболеваний.
Витамин С оказывает положительное воздействие на углеводный обмен.
Волынский З. М. с сотрудниками показали, что повышает синтез гликогена в
печени, и что нарастание содержания гликогена в печени, как правило, прямо
пропорционально повышению в этом органе витамина С. К такому выводу
позволяют прийти многочисленные клинические наблюдения последнего времени,
подтверждающие ценное свойство АК обладать нормализующим действием на
уровень сахара в крови. Подобный эффект связан с синергическим действием
аскорбата и гормонов – инсулина и адреналина. Витамин С может усиливать
действие инсулина или действовать аналогично ему, способствуя образование
гликогена в печени. Синергизм возникает косвенным путем через воздействие
инсулина и витамина С на общегормональный фон организма.
Таким образом, АК оказывает разностороннее влияние на процессы обмена
веществ у здоровых людей, а при различных патологических состояниях
благоприятствует нормальному течению обмена веществ и функционированию
различных органов и систем организма (Бременер; 1997).
5 Сахарный диабет как один из распространенных патологических процессов
Диабет сахарный (diabetes mellitus; сахарная болезнь, сахарное
мочеизнурение) – эндокринное заболевание, обусловленное дефицитом гормона
инсулина в организме или его низкой биологической активностью;
характеризуется хроническим течением, нарушением всех видов обмена веществ,
ангиопатией.
Сахарный диабет представляет собой самую распространённую эндокринную
патологию. В его развитии существенную роль играют наследственная
предрасположенность и неблагоприятное воздействие окружающей среды, однако,
характер наследственной предрасположенности и так называемых факторов риска
различны при разных типах сахарного диабета. Факторами риска развития
сахарного диабета являются появление антител к (-клеткам островков
поджелудочной железы, частые вирусные инфекции, гиподинамия, ожирение,
нерациональное или недостаточное питание, стрессы, генетически отягощенный
по сахарному диабету анамнез и другие.
Согласно классификации ВОЗ, различают два основных типа сахарного
диабета. Это инсулинзависимый (I тип) и инсулиннезависимый (II тип)
сахарный диабет. Инсулинзависимый сахарный диабет, как правило, развивается
у лиц молодого возраста и детей, имеющих генетическую предрасположенность к
сахарному диабету именно данного типа. Инсулиннезависимым сахарным диабетом
чаще болеют лица, старше 50 лет (особенно женщины). Наследственная
предрасположенность играет большую роль, чем при сахарном диабете I – типа.
Механизм развития сахарного диабета сложен и многогранен. Он зависит
как от функции самой поджелудочной железы, так и от внепанкреатических
факторов. Прежде всего, нарушен обмен углеводов. Из-за недостатка инсулина
или других причин затрудняется переход глюкозы в мышечную и жировую ткань,
снижается синтез гликогена в печени, усиливается образование глюкозы из
белков и жиров (глюконеогенез). В развитии этих процессов увеличивается
содержание глюкозы в крови. Если в норме оно довольно устойчиво и натощак у
здоровых людей колеблется в пределах 3,33 – 35,55 ммоль/л (70 – 100 мг%),
то при сахарном диабете в зависимости от формы и тяжести течения обычно
превышает 6,00 ммоль/л, достигая 20 –30 ммоль/л и больше.
Диабет у детей и подростков характеризуется тяжелым течением и, как
правило, острым началом заболевания. От времени появления первых признаков
заболевания (жажда, похудание, выделение большого количества мочи, общая
слабость, сухость кожи) до развития тяжёлого состояния и значительных
нарушений обмена веществ, проходит обычно 2 недели. Дети, больные сахарным
диабетом, требуют обязательного лечения и постоянного лечебного контроля.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Нами обследован 41 ребёнок, страдающий инсулинзависимым сахарным
диабетом, и 10 человек контрольной группы. Объектом исследования служили
эритроциты больных и здоровых детей. Для получения эритроцитов кровь брали
из локтевой вены капельным способом, в качестве антикоагулянта использовали
гепарин.
Исследования проводили в общей эритроцитарной массе детей, страдающих
инсулинзависимым сахарным диабетом, и детей контрольной группы.
2.1. Подготовка эритроцитов
Свежую гепаринизированную кровь разливали в центрифужные пробирки по 5
мл. После пятнадцатиминутного центрифугирования при 3000 об/мин при 40 С
отбирались и отбрасывались лейкоцитарный слой и плазма. Эритроциты
суспендировали в десятикратном объёме 0.9% раствора NaCl и
центрифугировали в течение пятнадцати минут при 3000 об/мин. Супернатант
отсасывали, процедуру повторяли 3 раза. Это делалось для более плотной
упаковки эритроцитов.
2.2. Метод раздельного определения аскорбиновой, дегидроаскорбиновой и
дикетогулоновой кислот в эритроцитах
Для количественных определений АК, ДАК и ДКГК использовали метод J.H.
Roe, C.A. Kuether (1943) в модификации В.В. Соколовского, Л.В. Лебедевой,
Т.Б. Лиэлуп (1967). Метод основан на взаимодействии 2,4-
динитрофенилгидразина с ДАК с образованием в серной кислоте
соответствующего озазона. ДАК и ДКГК дают красное окрашивание, используемое
для фотометрического определения. Для вычисления суммы всех кислот их
окисляют 2,6- дихлорфенолиндофенолятом натрия. Содержание АК определяют по
разности. Для дифференцированного определения ДАК и ДКГК смесь подвергают
действию восстановителей, при этом в АК восстанавливается только ДАК. В
качестве восстановителя использовали димеркаптопропансульфонат натрия
(унитиол)
Реактивы:
1. 2.10 М унитиол (0.84 мл 5% раствора ампулированного препарат в 100 мл
0.2 М фосфатного буфера рН 7.0. хранить не более суток).
2. 5% трихлоруксусная кислота (ТХУ). Хранить в холодильнике не более
двух недель.
3. 85% раствор серной кислоты (100 мл воды + 900 мл концентрированной
серной кислоты).
4. 2% раствор 2,4-динитрофенилгидразина в 9Н серной кислоте, содержащей
0.25% тиомочевины (хранить в холодильнике не более 1 месяца).
5. 0.001 Н раствор 2,6- дихлорфенолиндофенолята натрия (краска
Тильманса). Хранить в темноте не более 1 недели.
6. 0.9% раствор хлорида натрия (физиологический раствор).
Ход определения.
В три пробирки помещали по 0.5 мл упакованных и отмытых от плазмы
эритроцитов с известным гематокритом. В первую прибавляли 0.25 мл
физиологического раствора и 0.25 мл унитиола. После пятнадцатиминутной
инкубации при периодическом помешивании суспензии отбирали 0.5 мл
экстракта, к которому прибавляли 1.5 мл ТХУ.
В две другие пробирки также прибавляли по 1.5 мл ТХУ.
В две пробирки вносили по 0.75 мл супернатанта, полученного при
центрифугировании смеси упакованных эритроцитов с ТХУ. В одну из пробирок
добавляли по каплям 0.001 Н раствор 2,6- дихлорфенолиндофенолята натрия до
появления слаборозового окрашивания, устойчивого в течение 30 секунд. В
третью пробирку помещали 0.75 мл супернатанта, полученного после
центрифугирования смеси упакованных эритроцитов с физиологическим
раствором, унитиолом и ТХУ. Во все пробирки добавляли по 0.25 мл 2,4-
динитрофенилгидразина и доводили объём до 1.25 мл дистиллированной водой,
инкубировали при 100 0 С в течение 10 минут и охлаждали в ледяной бане. В
каждую пробирку добавляли небольшими порциями 1.25 мл 85% раствора серной
кислоты, охлаждая в ледяной бане после каждой порции. Окрашенные растворы
фотометрировали через час при длине волны 540 нм.
Концентрацию кислот определяли по формуле:
С = (3*А)/0.085; где
С – концентрация кислот, мг%
3 – концентрация стандартного раствора, мг%
А – оптическая плотность пробы
0.085 – оптическая плотность стандартного раствора
2.3. СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ
Результаты исследований обрабатывались статистически (Лакин И.А., 1976).
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Целью исследования являлось определение содержания аскорбата и его
окисленных форм – ДАК и ДКГК в общей эритроцитарной массе взрослых,
страдающих ИЗСД, со стажем болезни более 10 лет; сравнение и сопоставление
полученных результатов с данными, полученными ранее, в ходе работы со
здоровыми детьми и страдающими ИЗСД. В эксперименте участвовал 21 взрослый
в возрасте от 25 до 40 лет, 37 больных детей и группа контроля, включающая
10 здоровых детей. Результаты исследований отображены на диаграммах.
Рис.1. Содержание общей АК, АК, ДАК и ДКГК в эритроцитах здоровых детей
и детей, страдающих ИЗСД (мг%)
Рис. 2. Содержание общей АК, АК, ДАК и ДКГК в эритроцитах взрослых,
страдающих ИЗСД (мг%)
Как следует из полученных результатов, в эритроцитах детей и взрослых,
страдающих ИЗСД, наблюдается увеличение содержания окисленной форма АК-ДАК,
что может свидетельствовать о нарушении процесса восстановления АК в ДАК,
большем участии АК в метаболических процессах, нарушении транспорта АК в
клетке.
Процентное содержание общей АК, АК, ДАК и ДКГК также демонстрирует
превалирование окисленных форм АК над восстановленной.
Рис. 3. Содержание общей АК, АК, ДАК и ДКГК в эритроцитах здоровых детей
и страдающих ИЗСД (%).
Рис. 4. Содержание общей АК, АК, ДАК и ДКГК в эритроцитах взрослых,
страдающих ИЗСД (%).
Все полученные данные согласуются с данными литературы об изменении
общего количества АК в организме при патологии (нормальное содержание
составляет 5 – 15 мг%) и соотношения «окисленная форма АК/восстановленная
форма АК» в сторону увеличения первой.
ВЫВОДЫ
1. Содержание общей АК в эритроцитах детей и взрослых, страдающих ИЗСД,
составляет 19.52 мг% и 6,47 мг%, в эритроцитах здоровых детей –
12.48 мг%.
2. Содержание восстановленной АК в эритроцитах больных детей и взрослых
составляет 4.1 и 2,01 мг% (20.5 и 31% от общей АК), в эритроцитах
здоровых детей – 4.28 мг% (33%).
3. Содержание окисленных форм АК – ДАК и ДКГК в эритроцитах больных
детей и взрослых составляет 15.5 и 4.46 мг% (79.5 и 69% от общей
АК), в эритроцитах здоровых детей – 8.36 мг% (67%).
4. В общей эритроцитарной массе больных детей соотношение окисленная
форма АК/ восстановленная форма АК составляет 4/1, что
свидетельствует о превалировании окисленной формы АК над
восстановленной.
5. В общей эритроцитарной массе здоровых детей это соотношение равно
2/1, т.е., налицо тенденция к росту содержания восстановленной АК.
Заключение
Уже давно доказали тот факт, что аскорбиновая кислота является
постоянной составной частью тканей и органов человека. Важность выполняемых
ею физиологических функций не подлежит сомнению. Некоторые из них давно
известны и хорошо изучены. Например, то, что витамин С оказывает
благоприятное воздействие на работу иммунной системы, нормализует
эритропоэз и продукцию коллагена, является компонентом антиоксидантной
системы клетки. Однако многочисленные исследования недавнего времени
показали, что возможности этого вещества гораздо шире, чем представлялось
до сих пор. К примеру, было обнаружено ценное свойство аскорбата
нормализовать уровень сахара в крови, оказывая положительное воздействие на
углеводный обмен. При выполнении этой и других биохимических функций
аскорбиновая кислота обратимо окисляется в ДАК, при последующем воздействии
окислителя необратимо переходит в ДКГК. По данным литературы, соотношение
«окисленная форма АК/восстановленная форма АК» может изменяться при
различных патологиях, как и ее общее содержание в организме. Одной из
распространенных патологий является инсулинзависимый сахарный диабет.
Поскольку ИЗСД является эндокринной патологией, протекающей с нарушением
углеводного обмена, в регуляции которого аскорбат играет немаловажную роль,
было бы логичным предположить, что его содержание в организме больного
окажется иным, чем у здорового человека. Экспериментальные данные
подтвердили это предположение. В организме больного ребенка содержание
общей АК повышено на 37 % по сравнению с общей АК и составляет 19,52 мг%,
тогда как нормальным считается наличие от 5 до 15 мг% аскорбата. Среднее
значение АК у здорового ребенка – 12,48 мг%. В то время как содержание ДКГК
в процентном соотношении практически не изменено и составляет у больных и
здоровых детей 46 и 49,4 % соответственно (6,16 мг% и 8,96 мг%),
концентрация ДАК у больных детей повышена против здоровых почти вдвое и
составляет 33,5 % вместо 17,6 % (6,54 мг% и 2,2 мг%). Основные различия
выявляются в процентном содержании восстановленной формы АК. Ее содержание
у здоровых детей составляет 33 % общей АК (4,28 мг%), тогда как у больных
детей оно ниже на 13 % и составляет 4,1 мг%. Таким образом, соотношение
«окисленная форма АК/восстановленная форма АК» у больных детей составляет
4:1, в отличие от здоровых детей, у которых оно равняется 2:1.
На основании этих данных можно предположить следующие причины подобных
изменений содержания общей АК и ее метаболических форм в организме больных
ИЗСД детей:
1) При ИЗСД нарушены все виды обмена веществ в организме – углеводный,
белковый и жировой. В последнем случае возрастает количество
свободных радикалов, вследствие чего АОС испытывает большую нагрузку.
Возрастает содержание одного из ее компонентов – аскорбата, он более
активно включается в метаболические процессы, возможно, тем самым в
какой-то мере компенсируется снижение концентрации другого ее
компонента – С-SH;
2) Почти двукратное возрастание уровня ДАК в организме больного ребенка
при практически неизменном количестве ДКГК может свидетельствовать о
нарушении процесса восстановления ДАК в АК; возможно снижена
активность фермента ДАК – редуктазы. При ИЗСД ее активность снижена
на 50 %, что приводит к сокращению содержанияС-SH, необходимого для
процесса восстановления ДАК в АК. Одновременно снижается активность
ГБФДГ, в реакции которой образуется необходимый для работы С-R NADPH;
3) Нарушение транспорта АК в клетке.
Несколько иная картина наблюдается в отношении взрослых, страдающих
ИЗСД. Здесь общее содержание АК находится близко к нижнему пределу нормы и
составляет 6,47 мг%. Содержание ДКГК составляет 11,4 % (0,73 мг%), ДАК –
57,6 % (3,73 мг%), АК – 31 % (2,01 мг%). Сопоставляя эти показатели с
таковыми у детей, можно заключить, что активное участие АК в работе АОС
решено не количественным, а качественным путем. Так, доля неактивной ДКГК
составляет 11 %, тогда как на долю метаболически активных АК и ДАК
приходится 89 % от общего количества АК. Такое превалирование активных форм
АК особенно в сочетании с повышенным содержанием АК может указывать на
своеобразную «адаптацию» фермента ДАК-редуктазы в ходе многолетнего лечения
болезни (свыше 10 лет). Для подтверждения данных предположений и выяснения
механизма приспосабливаемости (если таковая имеется) необходимы дальнейшие
исследования.
В настоящее время определенно сказать можно следующее: страдающие ИЗСД,
особенно дети, в процессе лечения нуждаются в проведении антиоксидантной
терапии.
литература
1. Абрамова Ж.И., Оксенгендлер Г.И. Человек и противоокислительные
вещества. –Л.:Наука, 1985. –230 С.
2. Авраамова Т.В., Титова Н.М. Руководство по большому биохимческому
практикуму. –Красноярск: Изд-во КГУ, 1978, ч.1. –С.80-82.
3. Асатиани В.С. Ферментные методы анализа. –М.:Наука, 1969. –С.26-40.
4. Ахромеева Г.И. Определение дегидроаскорбиновой кислоты в пищевых
продуктах //Вопросы питания. –1988. -№3. –С.66-88.
5. Ашкинази И.Я. Разрушение эритроцитов // Физиология системы крови.
Физиология эритропоэза. –Л.:Наука, 1979. –С.274-334.
6. Березовский В.М. Химия витаминов. –М.:Пищевая промышленность, 1973.
–С.230-300.
7. Борец В.М. Витамины. –М.:Наука, 1980. –29 С.
8. Бохински Р. Современные воззрения в биохимии. –М.:Мир, 1987. –С.120-
154.
9. Браунштейн А.Е. Процессы и ферменты клеточного метаболизма.
–М.:Наука, 1987. –44С.
10. Бременер С.М. Витамины. –М.:Медицина, 1974. –194С.
11. Бреслер В.М., Никифоров А.А. Транспорт органических кислот через
плазматические мембраны дифференцированных эпителиальных слоёв у
позвоночных. –Л.:Наука, 1981. –С.52-111.
12. Букин В.Н. Биохимия витаминов. –М.:Наука, 1982. –С.17-19.
13. Владимиров Г.Е. Об энергетической функции АТФ в клетке. –Л.:Наука,
1980. –44С.
14. Гаврилов О.К., Козинец Т.И., Черняк Н.В. Клетки костного мозга и
периферической крови. –М.:Медицина, 1985. –288С.
15. Галактионов С.Г. Биологически активные. –М.:Молодая гвардия, 1988.
–С.4-84.
16. Григорьев Г.П. Цитохром Р-450 и витамин С //Вопросы питания. –1983.
-№4. –С.5-10.
17. Дегли С., Никольсон Д. Метаболические пути. –М.:Мир, 1973. –С.189-
196.
18. Домбровская Ю.В. Витаминная недостаточность у детей. –М.:Медицина,
1983. –63С.
19. Ефимов А.С., Бездробный Ю.В. Структура и функции инсулиновых
рецепторов. –Киев.:Наукова думка, 1987. –С.4-104.
20. Канунго М. Биохимия старения. –М.:Медицина, 1982. –194С.
21. Киверин М.Д. Витамин С и профилактика С-витаминозных состояний на
Севере. –Сев.-Зап. книжное изд., 1971. –С.5-7.
22. Кон Р.М. Ранняя диагностика болезней обмена веществ. –М.:Медицина,
1986. –С.17-42.
23. Косяков К.С. Клиническая биохимия. –Л.:Медицина, 1997. –С.113-118.
24. Меньщикова Е.Б., Зенков Н.К. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных
окислительных процессов // Усп. совр. биол. –1993. –№4. –С.442-455.
25. Мережинский М.Ф. Нарушения углеводного обмена при заболеваниях
человека. –Минск.:Медицина, 1987. –С.22-28.
26. Моисеева О.И. Физиологические механизмы регуляции эритропоэза.
–Л.:Наука, 1985. –185С.
27. Мосягина Е.Н., Владимирская Е.Б. Кинетика эритрона //Кинетика
ферментативных элементов крови. –М.:Медицина, 1976. –С.101-122.
28. Мосягина Е.Н., Фёдоров Н.А., Гудим В.И. Эритропоэз // Нормальное
кроветворение и его регуляция /Под ред. Н.А.Фёдорова. –М.:Медицина,
1976. –С.341-457.
29. Новое в гематологии /Под ред.А.И. Воробьёва, Ю.И.Лория.
–М.:Медицина, 1974. –С.18-22.
30. Новикова С.Г. На приёме больной сахарным диабетом //Здоровье. –1997.
-№3.-С.14-19.
31. Спиричев В.Б. Врождённые нарушения обмена витаминов. –М.:Медицина,
1995. –С.12-19.
32. Патологическая биохимия /Под ред. А.Ф. Симёнова. –М.:Медицина, 1994.
–С.130-147.
33. Рубина Х.М. Биохимия эритроцитов //Физиология системы крови.
Физиология эритопоэза. –Л.:Наука, 1978. –С.211-232.
34. Рубина Х.М. Некоторые данные о связи метаболизма эритроцитов с их
кислородно-транспортной функцией //Проблемы гематологии и
переливания крови. –1973. -№8. –35С.
35. Рысс М.Н Витамины. –Л.:Наука, 1963. –С.3-9.
36. Свободные радикалы в биологии /Под ред. У.Прайор. –М.:Мир, 1979.
–С.272-308.
37. Смирнов Н.И. Витамины. –М.:Медицина, 1974. –С.34-40.
38. Соколовский В.В., Лебедева Л.В., Лиэлуп Т.Б. Определение
аскорбиновой, дегидроаскорбиновой и дикетогулоновой кислот в
биологических тканях // Лаб.дело. –1967. -№12. –С.160-162.
39. Суровова А.П. Витамины в нашем рационе // Здоровье. –1997. -№2.
–С.17-20.
40. Схимниковский Б.Г. Авитаминозы у детей //Здоровье. –1998. -№6. –С.11-
13.
41. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритроцитарных
мембран. –Минск: Наука и техника, 1981. – С.23-56.
42. Черняк Н.Б. Биохимические процессы при созревании и старении
эритроцитов //Нормальное кроветворение и его регуляция.
–М.:Медицина,1976. –С.159-186.
43. Baker W.I. Urate and ascorbate: their possible roles as antioxidants
in determining longevity of mammalian species //Arch. Biochem. and
Biophis. –1987. -№2. –Р.451-457.
44. Basu S., Som S., Ded S. Dehydroascorbic acid reduction in human
erythrocytes //J. Chromatogr. Biomed. Appl. –1991. -№1-2. –Р.529-
542.
45. Burns J., Evans C. Ascorbic acid in human erythrocytes // J. Biol.
Chem. – 1996. - №4. – P. 223-241.
46. Penney J., Zilua S. Role of ascorbate in our organism // J. Biochem.
– 1994. - №2. – P. 37-49.
47. Pradhu H.R., Krishnamurthy S. Inhibition of ascorbate autooxidation
by human blood //Curr. Sci. (India). –1986. -№8. –Р.403-405.
48. Sahashi Y., Mioki T., Hasegama T. Reduction of ascorbate in
erythrocytes // J. Vitaminol. – 1996. - №12. – P.6 – 14.
49. Thompson R.Q. Ascorbic acid content of plasma and cellular
components of blood //Anal.Chem. –1987. -№8. –Р.1119-1121.
50. Yamazaki M., Mioki T. Ascorbic acid is cellular components // J.
Ferment. Technolog. – 1995. - №7. – P. 422-513.
SUMMARY
The main aim of this work is the study of concentration ascorbic acid,
dehydroascorbic acid and DCGA in the human’s erythrocytes. The
concentrations of the AA, DAA & DCGA were learned in the common
erythrocytes mass.
Our results showed that concentration of AA is lower that concentration
of DAA, DCGA.
Приложение 1
Содержание АК, ДАК и ДКГК в эритроцитах детей, страдающих
инсулинзависимым сахарным диабетом (мг%)
|№ |( АК |ДКГК |ДАК |АК |
|1 |27,32 |13,06 |7,9 |6,36 |
|2 |27,68 |16,66 |8,9 |2,12 |
|3 |12,56 |5,3 |3,52 |3,74 |
|4 |17,86 |10,02 |4,16 |3,68 |
|5 |19,78 |11 |6,36 |2,42 |
|6 |17,84 |10,66 |6,70 |0,84 |
|7 |26,64 |12,14 |7,8 |6,7 |
|8 |13,18 |4,14 |3,88 |5,16 |
|9 |18,04 |10,26 |4,40 |3,38 |
|10 |19,74 |11,12 |6,22 |2,4 |
|11 |27 |16,94 |8,06 |2 |
|12 |18,14 |10,8 |6,82 |0,52 |
|13 |19,76 |8,48 |4,24 |7,04 |
|14 |14,82 |8,32 |5,30 |1,2 |
|15 |27,52 |8,48 |9,32 |9,68 |
|16 |17,01 |8,15 |6,8 |2,06 |
|17 |19,5 |7,01 |9,1 |3,39 |
|18 |16,4 |6,4 |5,43 |4,57 |
|19 |17,7 |5,22 |7,92 |4,56 |
|20 |12,4 |4,81 |6,1 |1,49 |
|21 |16,33 |7,49 |6,4 |2,44 |
|22 |17,77 |6,29 |9,2 |2,21 |
|23 |23,27 |10,01 |7,6 |5,66 |
|24 |18,8 |7,26 |8,13 |3,41 |
|25 |20,5 |8,16 |7,3 |5,04 |
|26 |22,55 |9,25 |6,24 |7,06 |
|27 |17,74 |9,14 |6 |2,6 |
|28 |19,22 |7,17 |7,3 |4,75 |
|29 |16,38 |6,19 |6,29 |3,9 |
|30 |24,14 |10,21 |7,24 |6,69 |
|31 |16,88 |8,19 |5,3 |3,39 |
|32 |19,02 |9,14 |4,9 |4,98 |
|33 |19,74 |6,7 |7,16 |5,88 |
|34 |22,16 |10,2 |8,12 |3,84 |
|35 |16,01 |6,9 |5,49 |3,62 |
|36 |13,3 |7,1 |4,2 |2,08 |
|37 |19,2 |9,03 |6,59 |3,58 |
|( |19,52 |8,96 |6,54 |4,1 |
|% |100 |46 |33,5 |20,5 |
Приложение 2
Содержание АК, ДАК и ДКГК в эритроцитах детей, страдающих
инсулинзависимым сахарным диабетом и здоровых детей
форма ( АК ДКГК ДАК АК
( АК ДКГК ДАК АК
АК М( m М( m М( m М( m
М( m М( m М( m М( m
С 19.52 8.96( 0.9 6.54( 0.49 4.1(
0.04 12.48(0.5 6.16( 1.01 2.2 ( 0.56 4.28 ( 0.82
(0.89
% 100 46 33.5
20.5 100 49.4 17.6
33
Р <0.01 <0.05 <0.01 <0.01 <0.01
<0.05 <0.01 <0.01
-----------------------
[pic]
[pic]
[pic]
[pic]
[pic]
[pic]
Здоровые
Больные
Страницы: 1, 2
|